依据朗白一比耳定律，当波长和强度一定的人射光经过光程长度固定的有色溶液时，吸光度与有色溶液浓度成反比。通常在比色剖析及可见光分光光度剖析中，需求绘制规范曲线(任务曲线)，即固定液层厚度及入射光的波长和强度，测定一系列不同浓度规范溶液的吸光度，以吸光度为纵坐标，规范溶液浓度为横坐标作图，可失掉一条经过原点的直线。该直线称为规范任务曲线或任务曲线。在相反条件下测得试液的吸光度，从任务曲线上可查得试液的浓度，这就是任务曲线法。但在实践任务中，特别是在溶液浓度较高时，常会呈现规范曲线不成直线(如图6．25虚线所示)的景象，这种景象称为偏离比耳定律。若需用试液浓度在规范曲线弯曲局部，则测得的浓度必将具有较大的误差。 惹起偏离比耳定律的缘由次要是所用仪器不能提供真正的单色光，以及随着有色溶液浓度的增大发作了吸光物质性质的改动。这种偏离并不是由比耳定律自身不严厉所惹起，因而只能称为表观偏离。兹就惹起偏离的不同缘由讨论如下： 1．非单色光惹起的偏离 严厉地说，比耳定律只适用于单色光，但目前普通单色器所提供的入射光并非单纯的单色光，而是波长范围比拟窄的光带，实践上仍是复合光。 由于物质对不同波长光的吸收水平不同，因此用复合光时就会发作偏离。 实验证明，若能选用一束吸光度随波长变化不大的复合光作入射光来停止测定，所惹起的偏离就小，规范曲线根本上成直线。所以比色剖析并不严厉要求用很纯的单色光，只需入射光所包括的波长范围在被测溶液的吸收曲线较平直局部，也可失掉较好的线性关系。如图6．26所示，左图为吸收曲线与选用谱带关系，右图为T作曲线。若选用吸光度随波长变化不大的谱带A的复合光停止测量，则吸光度随波长变化较小，惹起的偏离也较小，吸光度与浓度根本呈直线关系。若选用谱带曰的复合光停止测量，则吸光度随波长的变化较分明，因而呈现分明的偏离，吸光度与浓度不成线性关系。2．化学要素惹起的偏离 朗白一比耳定律的根本假定，除要求入射光是单色光外，还假定吸收粒子是独立的，彼此之问无互相作用，因而稀溶液能很好地听从比耳定律。在高浓度时(通常>o．oltool几)由于吸收组分粒子问的均匀间隔减小，致使每个粒子都可影响其临近粒子的电荷散布，这种互相作用可使它们的吸光才能发作改动。由于互相作用的水平与浓度有关，随浓度增大，吸光度与浓度问的关系就逐步偏离线性关系。所以普通以为比耳定律仅适用于稀溶液。 另外，溶液中由吸光物质等构成的化学体系，常因条件的变化而构成新的化合物而改动了吸光物质的浓度，如吸光组分的缔合、离解，互变异构，络合物的逐级构成，以及与溶剂的互相作用等，都将招致偏离比耳定律。因而必需依据吸光物质的性质，溶液中化学均衡的知识，对偏离加以预测和避免，也必需严厉控制显色反响条件，以期取得较好的测定后果。